大家都知道一根色譜柱是比較昂貴的,作為一個色譜耗材,當然是讓色譜柱使用壽命盡量延長以降低成本。而影響色譜柱的使用壽命的因素大多的使用時的操作不當導致損壞色譜柱。想讓色譜柱用的久,得“好好用”才行!
使用前,做好這三個階段的操作注意事項:
一、使用前準備:
因為生物的復雜性,樣品純化程度越高,色譜柱的使用壽命就越長,因此樣品的預處理是十分重要的。比如溶劑的選擇、樣品過濾等。我們可以選擇色譜的純水作為溶劑,并且使用溶劑進樣口過濾器再過濾一次雜質、顆粒物等,這樣能更加“純凈”,對延長色譜柱的使用壽命有很大的幫助作用。
使用色譜柱前還要考慮其他的影響因素,如分析物的某些性質同樣能影響色譜柱的使用壽命。強酸、強堿性物質和蛋白質類生物大分子,它們能與固定相填料作用,或生成不可逆吸附層,改變填料表面特征,使色譜柱性能發生變化,終導致分離失效。
二、使用過程中:
避免機械沖擊,如果泵啟動太快,流速和柱壓的瞬間升高,柱床受到沖擊,會造成色譜柱損壞;
利用柱箱保持柱溫恒定,高于柱溫承受的范圍,會增加對流動相中化學物質的吸附,還可能改變峰形,降低柱效,造成不可逆性的損傷。
逐漸改變工作流量和壓力,切勿進行突然更改。流速過大,壓力升高,會引起色譜填料沖垮、塌陷。
在適宜的pH范圍內運行,以硅膠作基質的固定相一般要求pH在2.5~7范圍內使用。長期在pH>7或pH<2使用環境中,硅膠會逐漸溶解或者表面鍵合的官能團會逐漸流失。
避免進行大體積的進樣導致色譜柱超載,不要過度用力擰色譜柱,可能會造成損壞。
三、使用后的清洗與儲存:
色譜柱使用后要注意清洗,用較強的流動相沖洗,如果還是無法清洗干凈,可以采用更強的洗脫劑清洗。
色譜柱清洗完畢后,不要將色譜柱存儲在冰箱或熱風烤箱中,這可能導致固定相不可逆轉的損壞。使用前后輕拿輕放,注意不要磕碰或者用力撞擊導致損壞。
即使在采取了建議的預防措施之后,由于色譜柱的使用壽命有限,其性能也會受到影響。您應該定期注意色譜柱的性能,并采取有效措施觀察峰形的下降,保留時間的變化,分離度差或出現不需要的峰。
以上就是如何延長色譜柱使用壽命的一些注意事項,但上述是會影響色譜柱使用壽命的因素之一,使用前了解色譜柱,看色譜柱說明書,使用過程中小心操作,讓有經驗的人指導使用都可以避免色譜柱損壞。