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一種新的研究方法的誕生,大多是為了彌補現有技術的不足。反相液相色譜法能解決多種分析應用問題,但對極性和親水性化合物很少或無法保留保留。如果使用正相液相色譜法,用己脘或環已脘來分析這些物質也存在一些局限性,很多極性和親水化合物往往很難溶解,從而限制了NPLC的應用范圍。在此基礎上,誕生了一種新的解決辦法—親水作用液相色譜(HILIC)。在HILIC色譜柱上,物質的洗脫順序與RPLC恰恰相反,在RPLC柱上很難保留或根本不保留的物質,在通常的實驗條件下,它們在HILIC柱上有較強的保留。恒譜生USHA C18-A色譜柱適用于分離強極性和親水性化合物,含碳量10%,ph值2-8范圍內,孔徑、粒徑、柱長多種規格可選。
HILIC柱的固定相是親水的,并且通常在一定pH范圍內是帶電荷的。親水性越強的化合物,被保留的時間越長。和大多數其他液相色譜技術不同的是:HILIC的部分流動相是作為固定相的一部分來起作用的。色譜柱使用一段時間后會發現一些問題,比如柱效下架、分離效率變差等。當你發現HILIC柱出現分離效率變差、保留時間改變和校準曲線偏離等現象時,很可能色譜柱保留了一些不希望保留的物質,而使柱容量改變了。
如果柱壓升高,常常是因為樣品基質中的某些組分形成沉淀,堵塞了色譜柱入口的多孔濾片。恒譜生建議使用強緩沖液或鹽溶液在低流速下反向沖洗色譜柱來部分恢復柱子的性能。如果是柱效下降,可以考慮是否是死體積太大導致降低柱效。為減小死體積,色譜系統里所有的連接管線應盡可能的短。但是為了將峰加寬減至最小,且不降低柱效,用減小系統中連接各部件的所有管線內徑來減小死體積的效果是很有限的,這樣柱反壓會增大,并且會造成意外管線堵塞等。恒譜生PEEK管線具有優異的耐化學能力和生物可兼容性,PEEK管線能夠耐受鹵化鹽類、強緩沖液、強活性的流動相的侵蝕,適用范圍廣。