關于色譜保護柱,那些不得不說的事
色譜保護柱的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數;
在兩相中作相對運動時, 經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出, 通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。
色譜保護柱的相關知識點擴展:
1、保護柱基質物理性質:
硅膠純度:硅膠純度對強極性化合物的分離很為重要,殘留金屬離子濃度、硅膠的雜質會影響化合物的峰形,硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發生拖尾。
A型硅膠是由金屬硅酸鹽制備而來,具有很高的金屬含量,硅膠純度較低,可用作中性化合物和非離子化合物的分離。
B型硅膠是以無金屬的工藝制備而來,純度高、酸性較弱、只含有微量的金屬,可用于分離離子化合物、可電離化合物,特別是堿性化合物。
現在的色譜柱填料以B型硅膠為主,但是不同品牌、不同類型的色譜柱的硅膠表面金屬含量還是略有差別的,如果色譜峰形較差,需要關注不同品牌色譜柱的硅膠純度。
色譜柱尺寸:增加色譜柱長度,可以在一定程度上提高柱效,但也會升高壓力和導致峰展寬;寬柱徑,提高載樣量,但也會增加橫向擴散,同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節約溶劑,可減少橫向擴散,但壓力較大,對系統要求較高。
顆粒形狀:粒徑球形顆粒柱效高、重現性好、柱床結構均勻,不規則形柱床結構不均勻、流動相線速度不均勻,容易譜帶展寬;當使用粘度較大流動相時,球形顆??山档椭鶋?,延長色譜柱壽命。
粒徑:指柱填料顆粒直徑的大小,實際上色譜柱上所標的粒徑是一個平均值,通常3-10mm。
2、化學性質
鍵合類型:主要分為單齒鍵合和聚合體鍵合,單齒鍵合提高傳質,加快色譜柱平衡;而雙齒鍵合增加色譜柱穩定性,增加色譜柱載樣量,填料穩定性和了,組分保留時間的重現性就好了。
炭覆蓋率:高炭覆蓋率保留強、K值越大、提高分辨率、分析時間長;低炭覆蓋率保留弱、縮短運行時間。通常用含碳量來表示;一般C18含碳量為10~14%,高的可達18~20%??梢酝ㄟ^增加炭鍵的長度或鍵合密度來增加含碳量,含碳量增加了有利于不易保留化合物的分離。
好了,以上便是關于色譜保護柱的相關內容介紹了。