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液相色譜對于實驗室分析員來說是容易上手的儀器了，但就算是經驗豐富的分析員都會經常出現錯誤的操作導致液相色譜儀器發生故障。而這個時候分析員一般就會選擇把色譜柱進行反沖這個方法，但恒譜生在這里建議分析員在一般情況下還是不要反沖色譜柱，除非色譜柱有特別說明是可以反沖的。那么，哪些柱子不能反向沖洗呢？其實有兩種，一種是兩端柱篩板不一樣是不適合的，因為入口的那一端柱篩板的孔徑比較大會導致固體顆粒物質的堵塞，所以一旦進行反沖就有可能出現造成填料的流失從而導致分析柱的柱效下降的情況；另一種...

在高效液相分析檢測樣品的過程中，液相保護柱會受到來自于樣品及色譜系統的污染，從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。來自于色譜系統的污染主要指，HPLC儀器系統中部件磨損而產生的固體顆粒，以及流動相系統過濾不全部殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指，未全部溶解的樣品或者已全部溶解的樣品進入色譜系統中，由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異，導致沉淀析出污染系統。特別是對于中藥、天然產物、合成中間體及生物藥品的檢測，因基質的復雜性，色譜柱受污染的情況會更加嚴重。污染會導...

在正相色譜中，一般采用極性鍵合固定相，硅膠表面鍵合的是極性的有機基團，鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑，如烴類溶劑，或其中加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等)，以調節流動相的洗脫強度。通常用于分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬于分配色譜。組分的分配比K值，隨其極性的增加而增大，但隨流動相中極性調節劑的極性增大(或濃度增大)而降低。同時，極性鍵...

溶劑混合時氣泡的形成會導致液相色譜分析中的許多問題，這些問題可以通過對流動相進行脫氣來避免。當溶劑混合時，空氣的溶解度低于同比例的純溶劑，過量的空氣會從溶液中析出/冒泡。脫氣是用來描述溶解氣體從溶液中出來的術語。這種現象也可能發生在HPLC系統中，其中粗糙的表面會產生氣泡形成的成核位點。由于產生死體積，氣泡還可以改變流動相通過色譜柱的流量。在HPLC分析中，通過對流動相脫氣，可以在很大程度上避免因氣泡形成而產生的問題。一、HPLC系統中的除氣1.低壓混合：低壓混合系統更容易形...

在日常分離分析工作中，高效液相色譜柱的使用和維護十分重要，色譜柱使用是否得當，直接影響色譜柱的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。高效液相色譜柱的正確使用：（1）柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動，以免柱床產生空隙。（2）如果儀器用來做常規分析，樣品種類有限，但分析次數多，則不妨為每一類常規分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱子的壽命。（3）避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動...

高效液相色譜系統(HPLC)是指分析化學中的一種技術,用于識別、分離和量化混合物中的每種成分。C8和C18均指色譜柱鍵合面的烷基鏈，都用于高效液相色譜系統。一、什么是C18：C18柱、C8柱和C4柱都是直鏈烷基硅烷相。C18是辛基癸基硅烷，含有18個與二氧化硅結合的碳。因此C18比C8（8個碳）或C4（4個碳）具有更多的碳和更長的碳鏈。由于額外的碳，C18具有更大的表面積，流動相必須穿過。這在鍵合相和洗脫物之間提供了更多的相互作用時間。因此，樣品洗脫得更慢，分離度更高。C18...