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本文的重點是快速液相色譜和高效液相色譜。沒有一種完mei的協議適合每一種分離目的。因此,建議為您的特定應用程序優化方法。通過本文中列出的建議以及一些前期閱讀和測試,您將輕松純化您正在尋找的組件。一、快速液相色譜純化使用快速色譜法進行純化的缺點是該方法固有的分辨率較低。快速液相色譜柱使用更大的粒徑和柱容量,允許使用更多的起始材料,但以分辨率和純度為代價。如果化合物不需要更高的純度,或者如果下一步將進行HPLC,這可能是您的選擇。1、確定溶劑系統樣品的純度(即混合物中有多少化合物...
質譜(MS)使研究人員能夠研究許多特性,例如樣品的分子量、結構、特性、數量和純度。當與液相色譜技術相結合能成為一種強大的分析工具,能夠從復雜的生物混合物(如牛奶、血清和全脂)中提取有關一系列化合物的有意義的數據,包括藥物代謝物、肽和蛋白質-細胞裂解物。一、液相色譜與質譜在將樣品引入MS儀器之前,通常通過過濾掉顆粒物、濃縮分析物、脫鹽和通常分離出可能導致背景離子或抑制電離的化合物來制備樣品。大多數情況下,許多或所有這些步驟都是由HPLC、UPLC系統完成的。樣品制備需要對樣品進...
分析保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護柱可大大降低分析柱受污染的程度,延長分析柱使用壽命。保護柱位于進樣器與分析柱之間,作用主要兩方面:1.截留不溶性顆粒2.吸附樣品基質中的雜質以下幾種情況建議使用保護柱:1.中藥、天然產物及合成中間體等基質較復雜的樣品分析——因溶解性差異導致樣品析出而污染分析柱的情況比較嚴重,梯度洗脫時影響更大。2.生物樣品分析——因樣品的不可逆吸附導致的污染,保護柱可先于分析柱承受這種污染,從而延長分析柱壽命。保護柱很重要,但選擇合適的保護柱...
UHPLC是一種專門的色譜方法,與HPLC相比,它運行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC通過使用填充較小顆粒(通常直徑小于2µm)的較小色譜柱來實現這一點。生物化學、細胞和分子生物學、臨床醫學和許多其他領域的研究人員依靠UHPLC從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質、肽、代謝物、藥物化合物還是其他化學物質。盡管UHPLC的性能明顯更好,但它并不總是*。在您考慮改用UHPLC時,恒譜生將幫助您區分重要和不重要的內容。一、為什么選擇UH...
制備柱具有各種尺寸,可以實現高分辨率分析和快速的分析。在制備色譜中,達到高純度、高回收率和高通量的分離十分重要。制備柱主要應用在植物化學、藥物合成、生物化學等領域的產品的提取及純化工作中。不同的工作領域中組分的制備和純化量的差異較大。在生物技術領域中,酶的分離是μg級;在天然產物化學和合成化學領域中,為應對未知成分定性鑒別、結構測定、生物活性測試等要求,需要純化若干mg級的高純物;在藥品和醫藥學測試中,需要g級的標準品和對照品;在工業級提純中,目標產物工業化生產往往需要kg級...
一、分離模式選擇色譜柱的首要任務是選擇分離模式。分離分子的方法有很多,其中應用*泛的包括反相、正相、親水相互作用、離子交換和尺寸排阻HPLC。還有一些不太常見但更專業的分離模式,例如使用手性固定相或流動相的特定手性色譜。反相色譜柱通常用于非極性或弱極性有機化合物,它包含非極性固定相(如C18),通常與極性流動相配對。恒譜生C18AQ反相色譜柱在水下擁有*產品的壽命,適于極性較大的物質在高水相條件下的分析。但是該方法不適合應用于蛋白質,流動相通常含有低pH值的乙腈或甲醇,可能會...